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      葡聚糖凝膠G15

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      別 名
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產品參數 凝膠層析(gel chromatography)又稱分子篩過濾、排阻層析。凝膠是一種多孔性的不帶表面電荷的物質,當帶有多種成分的樣品溶液在凝膠內運動時,由于它們的分子量不同而表現出速度的快慢,在緩沖液洗脫時,分子量大的物質不能進入凝膠孔內,在凝膠間幾乎是垂直的向下運動,而分子量小的物質則進入凝膠孔內進行“繞道”運行,這樣就可以按分子量的大小,先后流出凝膠柱,達到分離的目的。凝膠層析可用于脫鹽、分離提純、測定高分子物質的分子量、高分子溶液的濃縮等,具有設備簡單,操作方便,分離迅速及不影響分子生物學活性等優點。
      性狀 凝膠層析(gel chromatography)又稱分子篩過濾、排阻層析。凝膠是一種多孔性的不帶表面電荷的物質,當帶有多種成分的樣品溶液在凝膠內運動時,由于它們的分子量不同而表現出速度的快慢,在緩沖液洗脫時,分子量大的物質不能進入凝膠孔內,在凝膠間幾乎是垂直的向下運動,而分子量小的物質則進入凝膠孔內進行“繞道”運行,這樣就可以按分子量的大小,先后流出凝膠柱,達到分離的目的。凝膠層析可用于脫鹽、分離提純、測定高分子物質的分子量、高分子溶液的濃縮等,具有設備簡單,操作方便,分離迅速及不影響分子生物學活性等優點。
      1. 溶脹
        取所需干膠,用5倍去離子水溶脹,2小時后待用。
        2. 裝柱
        2.1 凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液;可選中性附近的Tris-鹽酸、PBS緩沖液。
        2.2 將所取凝膠抽干,用初始緩沖液(按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例)配成勻漿并脫氣。
        2.3 將層析柱垂直固定,底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。
        2.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,使凝膠在柱內自由沉降,水封層析柱,沉降過夜。
        2.5 連結好柱子頂端活動柱頭,打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積,再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積,調節適配柱頭,使其盡量貼近膠面,最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
        注意:凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,裝柱效果可用丙酮-水溶液進行等板高度的檢驗。所有操作過程不能引入氣泡,保證裝膠的均勻度。
        3. 平衡
        將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導、pH等參數不變。
        4. 上樣
        切換轉換閥進行上樣,上樣量應盡可能減小;樣品的預處理:除鹽,平衡液配制,0.45mm微孔濾膜過濾。
        5. 洗脫
        用緩沖液洗脫,保持流速不變。
        6. 再生
        用高鹽濃度的緩沖液(含1-2mol/LNaCl)按操作流速沖洗3-5個柱體積,接著用平衡液洗到平衡3-5個柱體積。
      貯存 1. 包裝:聚胺酯瓶密封包裝,規格為1升、5升和10升。   2. 貯存:4°C冰箱保存;濕膠用20%乙醇保存。   3. 運輸:4°C、常壓、避光。   4. 保質期:5-10年。
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