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Ni-瓊脂糖凝膠
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| 貨號 | 規格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 1308131393 | 0 | ￥0 |
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| M D L | |
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| 產品參數 | 親和層析（affinity chromatography）是一種吸附層析，配體（或配基）和相應的配基（或配體）發生特異性結合，而這種結合在一定的條件下又是可逆的。所以將配體（或配基）固相化后，就可以使存在液相中的相應配基（或配體）選擇性地結合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質分開，達到分離提純的目的。親和層析具有高效、快速、簡便等優點。 |
| 性狀 | Ni-瓊脂糖凝膠FF是一種將螯合鎳鍵合在瓊脂糖微球上形成的金屬離子螯合親和層析分離介質。該產品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網架結構，與生物活性大分子有很好的相容性，具有高動態吸附容量，快流速操作等特點，主要用于分離組氨酸標記（His-Tag）的基因工程蛋白質的分離純化。
1. 裝柱 1.1 根據分離目標性質配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。 1.2 將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例）配成勻漿并脫氣。 1.3 將層析柱垂直固定，底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。 1.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內，使凝膠在柱內自由沉降，水封層析柱，沉降過夜。 1.5 連結好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積，再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積，調節適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。 注意：所有操作過程不能引入氣泡，保證裝膠的均勻度。 2. 平衡 將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數不變。平衡緩沖液根據目標物性質和pH要求可選擇Tris-鹽酸、PBS、檸檬酸-檸檬酸鈉、巴比妥、醋酸-醋酸鈉等緩沖液。 3. 上樣 切換轉換閥進行上樣，上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇，也可進行線性實驗找到最佳上樣量；樣品的預處理：用平衡液配制，0.45mm微孔濾膜過濾。 4. 沖洗 用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數不變，此時未吸附的組分被清洗出去。 5. 洗脫 Ni-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用咪唑溶液進行恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫，一般推薦增大咪唑濃度的梯度洗脫進行。 6. 再生 用平衡緩沖液按操作流速沖洗3-5個柱體積。 若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。 7. 在位清洗(CIP) 對于強結合蛋白質或脂類物質，首先采用0.05mol/LEDTA進行Ni2+的去除，接著可采用以下流程進行在位清洗：1mol/LNaOH洗2個柱體積，4mol/L尿素或3mol/L鹽酸胍洗2個柱體積，70%乙醇或30%異丙醇洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。最后用0.1mol/L的硫酸鎳重新固定Ni2+。 在位清洗可有效去除介質上的雜質，同時介質上的熱源也可基本去除。 |
| 貯存 | 1. 包裝：聚胺酯瓶密封包裝，規格為25毫升、100毫升、250毫升和1升。 2. 貯存：20%乙醇，4°C冰箱保存。 3. 運輸：4°C、常壓、避光。 4. 保質期：5-10年。 |
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