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      總RNA提取試劑盒

      英文名:
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      別 名
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產品參數 操作步驟:
      1. 樣品處理:
      a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混勻。
      b. 動物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織加1ml 裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
      c. 貼壁細胞:直接在培養板中加入裂解液裂解細胞,每106細胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
      d. 細胞懸液:離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml 裂解液混勻。
      e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3 倍體積紅細胞裂解液,混勻后室溫放置10 分鐘,10000rpm離心1 分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細胞,可加入2 倍體積紅細胞裂解液重復裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml 裂解液混勻。
      2. 將處理后的樣品在室溫放置5 分鐘,使得核酸蛋白復合物完全分離。
      3. 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘。
      4. 2-8℃ 12000 rpm 離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中,把水相轉移到新管中,不要吸到沉淀。
      5. 吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
      6. 第4 步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2 分鐘,2-8 12000rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
      7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
      8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
      9. 12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫放置數分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
      10. 將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到RNA

      注意事項:
      1 ,所有相關器皿耗材都應為RNase-free產品,操作過程要小心,帶口罩、手套避免環境中RNA酶污染樣品。
      2 ,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9 之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。
      性狀 試劑盒組成 50 100 保存
      有效期
      裂解液 50ml 100ml 2-8℃ 一年
      漂洗液 15ml 30ml RT 一年
      洗柱液 50ml 100ml RT 一年
      RNase free ddH2O 15ml 30ml RT 一年
      RNase free吸附柱 50個 100個 RT 一年
      RNase free收集管(2ml) 50個 100個 RT 一年
      貯存
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