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RNA病毒基因組提取試劑盒
英文名：
Cas號：
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檢測信息查詢
| 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 1308111196-50T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥1155 | |||
| 1308111196-100T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥1687.4 |
| 別 名 | |
| Cas號 | |
| M D L | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| 產(chǎn)品參數(shù) | 產(chǎn)品簡介：
本試劑盒適合于從血清、細(xì)胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因組，不適合于細(xì)胞等組織內(nèi)RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組RNA可用于RT-PCR實(shí)驗(yàn)。 操作步驟： 使用前請先在漂洗液中加入一瓶新開啟的無水乙醇，加入到離瓶口約0.5-1cm距離，蓋好搖勻。所有離心步驟均在2-8℃條件下進(jìn)行。 1、 取病毒上清液0.5ml，12000rpm離心5min，盡量吸盡上清使用，棄去沉淀（如無沉淀可省去此步）。 2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K，充分混勻，65℃消化10min，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。 3、 吸附柱前處理：從包裝中取出吸附柱，放入收集管中，加入700ul 洗柱液，室溫放置2分鐘，2-8℃ 12000 rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中待用。 4、 向病毒上清中加入500ul結(jié)合液，充分混勻。再向管中加入400ul無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響RNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，靜置2min。（吸附柱的最大容積為750ul，可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。） 5、 12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 6、 向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 7、 向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。 8、 12000rpm離心2min，將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。 10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50ul-100ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的RNase free ddH2O，室溫放置5min，12000rpm離心2min。即可得到高質(zhì)量的病毒基因組RNA。 注意事項(xiàng)： 1、經(jīng)常更換新手套。因?yàn)槠つw經(jīng)常帶有細(xì)菌，可能導(dǎo)致RNase污染。使用無RNase的塑料制品和槍頭避免交叉污染。 2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致提取的RNA提取量也下降。 3、若結(jié)合液中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解。 4、如果樣品消化不徹底，后面的離心步驟中可能會出現(xiàn)堵柱子的情況，可適當(dāng)延長離心時間。 5、洗脫緩沖液的體積最好不少于50ul，體積過小會影響回收效率。 6、RNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-70℃，以防RNA降解。 7、RNA檢測：得到的基因組RNA片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關(guān)。由于病毒不含有核糖體RNA，所以常規(guī)電泳無法檢測，只有后期實(shí)驗(yàn)才可檢測到。D260值為1相當(dāng)于大約40 μg/ml單鏈RNA。 |
| 性狀 | 試劑盒組成 50 100
蛋白酶K 1ml 2ml 洗柱液 50ml 50ml×2 結(jié)合液 25ml 50ml 漂洗液 15ml 30ml RNase free ddH2O 15ml 15ml×2 RNase free吸附柱 50個 100個 RNase free收集管(2ml) 50個 100個 |
| 貯存 | 室溫（15℃-25℃）干燥條件下可保存12個月，更長時間的保存可置于2℃-8℃。 |
- 苯基琥珀酸酐 1131-15-3
- 固相RNase清除劑
- 氯二氟乙酸酐 2834-23-3
- 4-甲基咪唑 822-36-6
- RNA病毒基因組提取試劑盒
- 2-甲基咪唑 693-98-1
- 總RNA提取試劑盒
- 2-氨基苯并咪唑 934-32-7
- RNA wait(非凍型組織RNA保存液)
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