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聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
英文名：
Cas號：
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檢測信息查詢
| 貨號 | 規格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 1308111178-20T | 現貨 | 0 | ￥396 | |||
| 1308111178-50T | 現貨 | 0 | ￥858 |
| 別 名 | |
| Cas號 | |
| M D L | |
| 分子式 | |
| 分子量 | |
| 產品參數 | 產品簡介：
本試劑盒采用可以高效、專一結合DNA的硅基質材料和獨特的緩沖液系統，從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA片段，同時除去蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質。使用本試劑盒回收的DNA可適用于后續各種常規操作，包括酶切、PCR 、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。 操作步驟： 第一次使用前請先在15ml漂洗液中加入60ml無水乙醇，所有離心步驟均可使用臺式離心機在室溫下離心。 1 ．將單一的目的 DNA條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入 1.5ml 離心管中，稱取重量，用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入 2 倍體積的溶液A 吹打混勻（每 100mg 膠加入200ul 溶液A），75℃水浴30分鐘。 2 ．用1ml 的去尖吸頭吸取混合物至過濾柱中（將膠一起吸入，溶液過多時可分次加入）。13,000rpm 離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉入新離心管中。 3. 取六倍體積溶液 B 加入原離心管中（每 100mg 膠加入600ul），清洗管壁后加入過濾柱中(溶液過多時可分次加入)，顛倒過濾柱或輕輕吹打幾次混勻，13,000rpm 離心1 分鐘。將所有收集的濾出液混合。 4 ．將總濾出液混勻后加入吸附柱中（溶液過多時可分次加入），13,000rpm 離心30-60 秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。 5 ．向吸附柱中加入 600μl 漂洗液（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），13,000rpm 離心30-60 秒，倒掉廢液，將吸附柱重新放入收集管中。 6 ．向吸附柱中加入 600μl 漂洗液，13,000rpm 離心30-60 秒，倒掉廢液。 7 ．將離心吸附柱放回收集管中，13,000rpm 離心2 分鐘，盡量除去漂洗液。將吸附柱開蓋置于室溫 1-2 分鐘，徹底晾干，以防止殘留的漂洗液影響下一步的實驗。 8 ．將吸附柱放到一個干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量 65–70℃預熱的洗脫緩沖液 20-30μ l ，室溫放置2 分鐘。13,000rpm 離心2 分鐘收集DNA溶液。注意：①為了增加回收效率，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，13,000rpm 再次離心1 分鐘。②洗脫緩沖液體積不應少于 20 μ l ，體積過小影響回收效率。③洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5 之間。 9 ．DNA回收產物直接后續實驗或者-20 ℃保存。 注意事項： 1 ．電泳時最好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。 2 ．切膠時，紫外照射時間應盡量短，以免對 DNA造成損傷。 3 ． 本試劑盒對<50bp DNA 片段回收效率偏低（30% 左右），如要回收，應加大結合液的體積，延長吸附和洗脫的時間。 4 ．回收率與初始DNA量和洗脫體積有關，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。 |
| 性狀 | 試劑盒內容： 20T 50T
溶液A 5ml 15 ml 溶液B 20ml 50 ml 漂洗液 15ml 15ml 洗脫液 1.5ml 1.5ml 研磨杵 20個 50個 過濾柱 20個 50個 吸附柱 20個 50個 說明書 1份 1份 |
| 貯存 | 室溫(15 ℃-25℃) 干燥保存，復檢期12 個月，2 ℃-8 ℃保存時間更長。 |
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