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      土壤基因組DNA提取試劑盒

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      別 名
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產品參數 產品簡介:
      本試劑盒適合于從褐土、淤泥、火山灰等各種極端土壤環境中提取微生物 DNA。對土壤中各種細菌、真菌
      有很好裂解效果,最大限度的保留了微生物DNA的多態性。
      本試劑盒采用我公司特有的腐殖質吸附材料,可高效專一的去除各種腐殖質成分而絲毫不會影響DNA的
      產率,純度較酚、氯仿抽提法提高數倍。
      使用本試劑盒提取的DNA產量大、完整性好,可直接用于各種常規操作,包括酶切、PCR 、文庫構建、
      Southern 雜交等實驗。
      操作步驟:
      使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機
      在室溫下離心。
      1、稱取土壤樣本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成細粉末,加入 450ul 溶液A 震蕩混勻。
      * 也可直接稱取樣本 0.1-0.5g 于離心管( 建議使用 2ml 圓底管) ,加入 450ul 溶液 A 劇烈震蕩混勻
      1-2min 至沒有固體塊。 使用液氮研磨效果最佳。
      2 、加入50ul 溶液B 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩),65℃水浴 6min,每2min充分顛倒混勻一次。
      3 、加入100ul 溶液C 充分顛倒混勻( 不要劇烈震蕩),12000rpm離心10min 。
      4 、將上清轉移到新的離心管,12000rpm離心2min 。
      5 、在吸附柱中加入 200ul 溶液D ,將離心后的上清加入到帶有溶液 D 的吸附柱中,用移液器吹吸幾次混
      勻,12000rpm離心1min。
      6 、將收集管中的濾出液混勻后重新吸入吸附柱( 必須),12000rpm離心1min。
      7 、倒掉收集管中的廢液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000rpm離心1min。
      8 、倒掉收集管中的廢液,重復步驟 7 兩次(共漂洗三次)。
      9 、倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管,12000rpm離心2min 。
      10、拿出吸附柱在室溫干燥數分鐘( 因季節及氣候等因素不等),或50℃干燥1min。
      11 、將吸附柱放入一個新的離心管中,加入 50-100ul 洗脫液(65 ℃預熱),12000rpm離心1min。
      12、將離心管中的液體重新加入到吸附柱中,12000rpm離心1min。離心管中即為土壤微生物 DNA 溶液。
      13、若產物PCR 效果差,可以適當稀釋 DNA產物,或添加1/10 體積的PCR 增強劑。
      注意事項:
      1 、新鮮的土壤樣本會得到更高的產率,不同樣本在采樣前應先查閱相應的最佳保存條件。
      2 、若溶液中出現渾濁可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不會影響結果。
      3 、在需要吸取上清液的步驟中應避免吸到沉淀,否則會堵塞吸附柱,并影響產物純度。
      4 、洗脫緩沖液的體積最好不少于 50ul ,體積過小會影響回收效率;建議使用試劑盒附帶的洗脫緩沖液,
      用水洗脫也會損失部分產物;DNA應保存在-20 ℃避免反復凍融,以防降解。
      5 、若產物含有腐殖質殘余則會嚴重影響 DNA的光吸收值,應采取電泳檢測和分光光度計檢測相結合的方
      式鑒定。
      6 、液體試劑避免接觸皮膚,若意外接觸應立即使用大量清水沖洗。
      性狀 試劑盒內容: 50T 100T
      溶液A 25ml 50ml
      溶液B 3ml 6ml
      溶液C 5ml 10ml
      溶液D 10ml 20ml
      漂洗液 15ml 15ml×2
      洗脫液 10ml 20ml
      吸附柱 50個 100個
      收集管 50個 100個
      PCR增強劑 500ul 1ml
      說明書 1份 1份

      注:試劑盒開封后溶液A、B 、C 、D 需在2-8℃保存。PCR 增強劑-20 ℃保存。
      貯存 室溫(15℃-25 ℃) 干燥保存,復檢期 12 個月,2 ℃-8 ℃保存時間更長。
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