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刀豆蛋白A-瓊脂糖凝膠
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| 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 1308131398 | 0 | ￥0 |
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| M D L | |
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| 產品參數 | 親和層析（affinity chromatography）是一種吸附層析，配體（或配基）和相應的配基（或配體）發(fā)生特異性結合，而這種結合在一定的條件下又是可逆的。所以將配體（或配基）固相化后，就可以使存在液相中的相應配基（或配體）選擇性地結合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質分開，達到分離提純的目的。親和層析具有高效、快速、簡便等優(yōu)點。 |
| 性狀 | 刀豆蛋白A-瓊脂糖凝膠FF是一種將刀豆蛋白A配基鍵合在瓊脂糖微球上形成的親和層析分離介質。該產品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網架結構，與生物活性大分子有很好的相容性，具有高動態(tài)吸附容量，快流速操作等特點，主要用于各種糖、糖蛋白、糖脂和帶甘露糖、葡萄糖殘基的IgM等的分離純化
1. 裝柱 1.1 根據分離目標性質配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。 1.2 將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例）配成勻漿并脫氣。 1.3 將層析柱垂直固定，底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。 1.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內，使凝膠在柱內自由沉降，水封層析柱，沉降過夜。 1.5 連結好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積，再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積，調節(jié)適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。 注意：所有操作過程不能引入氣泡，保證裝膠的均勻度。 2. 平衡 將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數不變。平衡緩沖液推薦pH為7.4，20mmol/LTris-HCl含有0.5mol/LNaCl（避免非特異吸附），并加入0.001mol/L的Mn2+或Ca2+。 3. 上樣 切換轉換閥進行上樣，上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇，也可進行線性實驗找到最佳上樣量；樣品的預處理：用平衡液配制，0.45mm微孔濾膜過濾。 4. 沖洗 用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH等參數不變，此時未吸附的組分被清洗出去。 5. 洗脫 刀豆蛋白A-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用pH4-6.5的硼酸緩沖液，硼酸可以與糖殘基結合，競爭性洗脫糖或糖蛋白。 6. 再生 用含0.5mol/LNaCl的，pH為8.5和pH為4.5的緩沖液按操作流速分別沖洗3-5個柱體積，接著用平衡液洗到平衡3-5個柱體積。 若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。 7. 在位清洗(CIP) 對于強結合蛋白質或脂類物質，可采用以下流程進行在位清洗：pH為6.5的0.1mol/L硼酸緩沖液洗2個柱體積，20%乙醇洗2個柱體積，0.1%TritonX-100洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。 在位清洗可有效去除介質上的雜質，同時介質上的熱源也可基本去除。 |
| 貯存 | 1. 包裝：聚胺酯瓶密封包裝，規(guī)格為5毫升、25毫升、100毫升、250毫升和1升。 2. 貯存：20%乙醇，4°C冰箱保存。 3. 運輸：4°C、常壓、避光。 4. 保質期：5-10年 |
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