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      大鼠脾臟淋巴細胞分離液試劑盒

      英文名:Rats spleen lymphocyte separation medium kit
      Cas號:
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      13081166151 200ml 咨詢客服 0 ¥1730
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      別 名
      Cas號
      M D L
      分子式
      分子量
      產品參數 【檢驗方法】
      全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。
      1. 首先制備脾臟組織單細胞懸液,制備方法詳見“脾臟組織單細胞懸液制備技術”。
      2. 取一支 15ml 離心管,加入與脾臟組織單細胞懸液等量的分離液(注:分離液最少不得少于 3ml)。
      3. 用吸管小心吸取脾臟組織單細胞懸液加于分離液液面上,400-500g,離心 20-30min。(注:根據脾臟組織單細胞懸液量確定離心條件,脾臟組織單細胞懸液量越大,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果)。
      4. 離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為稀釋液層。第二層為環狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。
      5. 用吸管小心吸取第二層環狀乳白色淋巴細胞層到另一 15ml 離心管中,向離心管中加入10ml 清洗液混勻細胞。
      6. 250g,離心 10min。
      7. 棄上清。
      8. 用吸管以 5ml 清洗液重懸所得細胞。
      9. 250g,離心 10min。
      10. 重復 7、8、9,棄上清后以 0.5ml 后續實驗所需相應液體重懸細胞。
      【注意事項】
      1. 全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果,最好在取樣 2h 內進行實驗,樣品存放時間越長,細胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
      2. 本實驗最好不要使用高聚合材質(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
      3. 吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數量增加。
      4. 分離液用量大于脾臟組織單細胞懸液樣本時,分離效果更佳。
      性狀 試劑盒內容:
      全血及組織稀釋液 100ml
      細胞洗滌液 100ml
      試劑C 100ml
      試劑F 100ml
      貯存 18-25℃保存,有效期 2 年。本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現白色結晶,影響分離效果。
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