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線粒體提取試劑盒
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| 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 庫存 | 價格 | 促銷價 | 訂購 |
| 1308111365-100T | 現(xiàn)貨 | 0 | ￥0 | |||
| 1308111365-50T | 3天 | 0 | ￥500 |
| 別 名 | |
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| 產(chǎn)品參數(shù) | 說明
線粒體提取試劑盒用于從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和硬組織（肌肉）以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。 三，操作步驟 1. 樣本處理 a. 組織勻漿：稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨組織20次； b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞，PBS洗滌，800 × g 5~10 min離心收集細(xì)胞。計數(shù)。每次提取需要5 × 107個細(xì)胞，加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi)，0℃冰浴研磨30~40次； 2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管，4℃，1000× g 離心5 min； 3. 取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000× g 再次離心5 min。 4．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管，線粒體沉淀在管底； 5. 在線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀，4℃，1000× g 離心5 min； 6．取上清，加入一新的離心管中，4℃， 12,000 × g 離心10 min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底； 6. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸線粒體沉淀，立即使用或-70℃保存。 四 注意事項(xiàng)： 1. 為保證獲得完整的線粒體，第一是全程低溫操作。第二是快速。第三，在不破壞亞細(xì)胞器的情況下破碎細(xì)胞是制備線粒體的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比，培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁，因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。 2. 以離心力g計算正確的離心速度，不同的離心機(jī)可據(jù)此精確計算離心速度。 3. 進(jìn)行Western Blot和2D-膠電泳，可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。 |
| 性狀 | 試劑盒組份
組份 (50T) (100T) Lysis Buffer 50 mL 100 mL Mito-Wash Buffer 25 mL 50 mL Store Buffer 5 mL 10 mL |
| 貯存 | 四周內(nèi)使用可4℃儲存，長期置-20℃ 轉(zhuǎn)速與離心力換算 G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２ G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來表示； [rpm] ２即：轉(zhuǎn)速的平方； R為半徑，單位為厘米 |
- RIPA組織/細(xì)胞裂解液
- 碳酸胍 593-85-1
- 高效RIPA組織/細(xì)胞裂解液
- 磷酸胍 5423-23-4
- 線粒體提取試劑盒
- 1,1,3,3-四甲基胍 80-70-6
- 二苯胍 102-06-7
- 細(xì)胞核提取試劑盒
- GST標(biāo)簽純化樹脂
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