基因重組別藻藍(lán)蛋白對(duì)小鼠S180肉瘤的抑制作用

摘　要　研究基因重組別藻藍(lán)蛋白(RAPC)的抑瘤作用，給皮下接種S180瘤細(xì)胞的小鼠，每天分別ig及ipRAPC13.4mg/kg，6.7mg/kg和3.4mg/kg，共10d，第11d處死小鼠，稱瘤重和胸腺重，計(jì)數(shù)白細(xì)胞。結(jié)果表明，RAPC對(duì)小鼠S180肉瘤有顯著抑制作用，瘤重抑制率在45%～64%之間，ig及ip均有效，對(duì)荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)和白細(xì)胞數(shù)量無明顯影響。
　　關(guān)鍵詞　基因重組別藻藍(lán)蛋白；S180肉瘤；白細(xì)胞；胸腺

Elementary Study of Recombinant Allophycocyanin(RAPC)
on S₁₈₀ Tumor in Mice
Tang Shuming,Huang Fang,Dou Changgui,Zhuang Guixia，
Qin Song¹,Wang Xihua¹,Zhou Lihong¹
(China Pharmaceutical University,Nanjing 210038；
¹Institute of Oceano logy,the Chinese Academy of Sciences,Qingdao 266071)

Abstract The mice were infecfed by S₁₈₀, then treated with Recombina nt Allophycocyanin(RAPC) ig or ip 13.4mg/kg,6.7mg/kg and 3.4mg/kg per day respectively for ten days.The animal were killed, tumor clot or thymus were wei ghed and the leukocyte were counted.The results sho wed that RAP C could decrease weight of tumor significatly.The inhibitory rate ranged from 45% to 64% and had no obvious effect on Thymus Index and leukocyte count.
Key Words RAPC(recombinant allophycocyanin), S₁₈₀ tumor,WBC, Thymus.

　　藻膽蛋白(Phycobiliprotein)是某些藻類特有的重要蛋白質(zhì)，主要包括藻藍(lán)蛋白、藻紅蛋白和別藻藍(lán)蛋白三類，其抗癌、抗放射及促進(jìn)造血功能的作用，國內(nèi)外均有研究^［1～4］。但從天然藻類提取、純化藻膽蛋白，工藝復(fù)雜，含量不穩(wěn)定。中國科學(xué)院海洋研究所與美國加州大學(xué)合作，成功地克隆了鈍頂螺旋藻(Spirulinaplatensis)別藻藍(lán)蛋白的基因，并通過構(gòu)成融合蛋白的方式，實(shí)現(xiàn)了在大腸桿菌中的高效表達(dá)，以此生產(chǎn)高純度別藻藍(lán)蛋白(Recombinant Allophycocyanin,RAPC)。本文用動(dòng)物移植性腫瘤，研究RAPC的抑瘤作用。

1　材　料
1.1　藥物
基因重組別藻藍(lán)蛋白(RAPC)由中國科學(xué)海洋研究所秦松博士提供，系基因工程產(chǎn)品經(jīng)提取、純化的別藻藍(lán)蛋白水溶液，濃度0.67mg/ml，冰凍保存，臨用時(shí)解凍，以蒸餾水稀釋至所需濃度，小鼠灌胃或腹腔注射(以生理鹽水稀釋)容積均按體重為0.2ml/10g，劑量按預(yù)試驗(yàn)結(jié)果確定。環(huán)磷酰胺(CY)，上海第12制藥廠。
1.2　動(dòng)物
ICR小鼠，18～20g，雄性，中國藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：蘇動(dòng)(質(zhì))字93021號(hào)。S₁₈₀肉瘤瘤株移自江蘇省腫瘤研究所，本室傳代，在無菌操作下，每鼠右前腋窩部皮下接種瘤細(xì)胞懸液0.2ml(鏡檢含瘤細(xì)胞數(shù)9.23×10⁷個(gè)/ml)。

2　方　法^［5］
小鼠接種瘤細(xì)胞次日，按體重隨機(jī)分5組，每組10只，于接種后24h給藥。大、中、小3個(gè)劑量給藥組分別igRAPC13.4mg/kg，6.7mg/kg和3.4mg/kg。陽性對(duì)照igCY20mg/kg，空白對(duì)照組ig生理鹽水，均以0.2ml/10g等容積灌胃，連續(xù)10d。末次給藥后24h，小鼠稱重，眼眶取血，作白細(xì)胞計(jì)數(shù)；脫頸椎處死，剝?nèi)×鰤K，分離、摘取胸腺，電子天平稱濕重，計(jì)算瘤重抑制率和胸腺指數(shù)。

3　結(jié)　果
抑瘤作用及胸腺指數(shù)見表1、表2。

Tab l　Effects of RAPC on tumor weigh tin mice

上海紫一試劑廠  克拉瑪爾 供應(yīng)高純?cè)逅{(lán)蛋白4001650900