蘇木素伊紅混合染色液(一步法)

簡介:

蘇木素(Hematoxy1in)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色，簡稱HE染色，是病理學常規(guī)制片中最基本的染色方法，應用極其廣泛。蘇木精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶，是- -種堿性染色劑，它在被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用，能夠使細胞核色。在病理診斷、教學和科研工作中，常用HE染色對正常組織和病變組織進行形態(tài)結構觀察。在HE染色的組織切片中，細胞核呈藍色，i細胞漿呈紅色，二者形成鮮明的對比，易于觀察分析。

   Leagene蘇木素伊紅混合染色液是把蘇木素和伊紅混合在一起，只需對細胞、組織等樣本染色一次，既能使蘇木素上色亦可使伊紅上色的新型染色液，可用于染色樣本的類型有石蠟切片、冰凍切片、血液涂片、培養(yǎng)細胞以及體液涂片(如宮頸粘液涂片、腦脊液涂片等)等，本產(chǎn)品尤其適用于血液涂片和體液涂片染色。

 

染色原理:

1、 細胞核染色的原理:

蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

2、細胞漿染色的原理:

伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時，胞漿蛋白質以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。

3、分化作用:

染色后，用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結構，使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊紅染色，才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

4、返藍作用:

分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài)，呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需:時間較長。

 

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1、鹽酸乙醇分化液

2、藍化液，如稀氨水、碳酸鋰溶液等

3、系列乙醇

操作步驟(僅供參考):

1、切片預處理:取血液涂片或體液涂片置于乙醇固定，用蒸餾水水洗。

2、蘇木素伊紅混合染色液滴染。

3、水洗。

4、用鹽酸乙醇分化，水洗。

5、用碳酸鋰水溶液返藍，水洗。

6、封片，光學顯微鏡下觀察、拍照。

染色結果:細胞核呈藍色;細胞質呈紅色。

注意事項:

1、 切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經(jīng)常更換新液。

2、鹽酸乙醇 分化時間應根據(jù)細胞涂片的具體情況而定。

3、藍化液常使用 0. 2~ 1%氨水或Scott促藍液或0. 1~ 1%碳酸鋰溶液。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性 手套操作。

有效期: 12 個月有效。.

 

 

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